Armonización de la determinación de ANCA por inmunofluorescencia indirecta: primera reunión argentina / Harmonization of the determination of ANCA by indirect immunofluorescence: first argentine meeting / Harmonização da determinação de ANCA por imunofluorescência indireta: primeira reunião argentina

Resumen La determinación de anticuerpos anti-citoplasma de neutrófilos (ANCA) es utilizada en la clínica diaria como una herramienta diagnóstica en distintas formas de vasculitis de pequeños vasos (vasculitis asociadas a ANCA), incluyendo la granulomatosis con poliangeítis (antes: granulomatosis de Wegener), poliangeítis microscópica y granulomatosis eosinofílica con poliangeítis (antes: síndrome de Churg-Strauss), y como apoyo diagnóstico de colitis ulcerosa, colangitis esclerosante primaria y enfermedad de Crohn. Estos anticuerpos están dirigidos contra distintos epítopos antigénicos de diferentes proteínas presentes en el citoplasma del neutrófilo. La determinación de ANCA, habitualmente realizada por la técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI), presenta cierto grado de complejidad en la definición de las imágenes de los diferentes patrones, variabilidad en la forma de trabajo y expresión de resultados. El 24 de octubre de 2018 en el marco del X Congreso Argentino de la Calidad en el Laboratorio Clínico y VIII Jornadas Latinoamericanas de la Calidad en el Laboratorio Clínico, en la Ciudad de Buenos Aires, se realizó una reunión de Armonización de la Determinación de ANCA por IFI con el objeto de presentar, discutir y consensuar los distintos aspectos que se presentan en esta técnica. Las propuestas iniciales fueron discutidas arribándose a recomendaciones generales para proporcionar estándares de trabajo e interpretación de imágenes con el objeto de disminuir la variabilidad de resultados entre los laboratorios clínico-inmunológicos.

Abstract Anti-neutrophil cytoplasmic antibodies (ANCA) tests are widely used in daily clinical practice as a useful tool for the diagnosis of pathologies such as granulomatosis with polyangiitis, microscopic polyangiitis, pauci-immune necrotizing segmental glomerulonephritis and eosinophilic granulomatosis with polyangiitis, ulcerative colitis, primary sclerosing cholangitis, Crohn's disease, etc. These antibodies are directed against different antigenic epitopes of various proteins which are present in the neutrophil cytoplasm. ANCA testing is usually carried out by using indirect immunofluorescence (IIF) method. The determination of ANCA presents some difficulties in the definition of the images of the different patterns, work protocols and result reports uniformity. The "Harmonization Conference on the Determination of ANCA by IIF" was held within the framework of the X Argentine Congress on Quality in the Clinical Laboratory and VIII Latin American Conference on Quality in the Clinical Laboratory, in Buenos Aires, Argentina, on October 24, 2018, in order to present, discuss and agree on different aspects of this method. Some initial proposals were discussed, arriving at general recommendations to provide standards of work and an image interpretation, with the aim of reducing the variability of results among the clinical-immunological laboratories.

Resumo A determinação de anticorpos anti-citoplasma de neutrófilos (ANCA) é utilizada na prática clínica diária como um suporte diagnóstico para várias patologias, como granulomatose com poliangiite, poliangiite microscópica, glomerulonefrite segmentar necrotizante pauci-imune e granulomatose eosinofílica com poliangiite, poliarterite nodosa, colite ulcerosa, colangite esclerosante primária, doença de Crohn. Esses anticorpos são dirigidos contra diferentes epítopos antigênicos de diferentes proteínas presentes no citoplasma do neutrófilo. A determinação de ANCA, normalmente realizada pela técnica de imunofluorescência indireta IFI, apresenta certo grau de complexidade na definição das imagens dos diferentes padrões, variabilidade na forma de trabalho e expressão de resultados. Em 24 de outubro de 2018, no âmbito do X Congreso Argentino de la Calidad en el Laboratorio Clínico (X Congresso Argentino da Qualidade no Laboratório Clínico) e VIII Jornadas Latinoamericanas de la Calidad en el Laboratorio Clínico (VIII Jornadas Latino-americanas da Qualidade no Laboratório), na cidade de Buenos Aires, foi realizada uma Jornada de Harmonização da Determinação de ANCA pelo IFI a fim de apresentar, discutir e concordar sobre os diferentes aspectos que são apresentados nesta técnica. As propostas iniciais foram discutidas, chegando a recomendações gerais para fornecer padrões de trabalho e interpretação de imagens visando reduzir a variabilidade de resultados entre os laboratórios clínico-imunológicos.

Determinación de anticuerpos anti-dsDNA: evaluación del desempeño de un inmunoensayo quimioluminiscente y correlación con el método de inmunofluorescencia indirecta / Detection of anti-dsDNA antibodies: evaluation of performance of a chemiluminescent immunoassay and correlation to the indirect immunofluorescence assay / Determinação de anticorpos anti-dsDNA: avaliação do desempenho de um imunoensaio quimioluminiscente e correlação com o método de imunoflourescência indireta

Resumen La determinación de anticuerpos anti-dsDNA es de utilidad para el diagnóstico y seguimiento clínico de pacientes con lupus eritematoso sistémico (LES) y es uno de los criterios de clasificación del SLICC-2012. El objetivo del estudio fue verificar el desempeño del inmunoensayo quimioluminiscente (CLIA) QUANTA Flash dsDNA y compararlo con el método en uso de inmunofluorescencia indirecta en Crithidia luciliae (CLIFT). Se analizaron con ambos métodos 195 pacientes con diagnóstico de enfermedades del tejido conectivo y solicitud de anticuerpos anti-dsDNA. Se obtuvieron 38 sueros positivos, 133 negativos y 24 (12,3%) discordantes. Entre estos resultados discordantes, hubo 17 que correspondieron a pacientes con LES y se agruparon en 16 CLIA+/CLIFT- y 1 CLIA-/CLIFT+. Se verificó el desempeño para precisión siguiendo el protocolo EP15-A2 y la linealidad. Se estudió la concordancia mediante el coeficiente Kappa y la correlación con el coeficiente Rho de Spearman. Se observó mayor sensibilidad diagnóstica para CLIA. El grado de acuerdo fue moderado y se obtuvo buena correlación entre los valores cuantitativos de CLIA y los títulos de CLIFT. De acuerdo al buen desempeño encontrado y a los resultados discordantes analizados, la mejor estrategia para la implementación de CLIA sería utilizarla en combinación con CLIFT, lo que aumentaría la sensibilidad diagnóstica sin perder especificidad.

Abstract The detection of anti-dsDNA antibodies is useful for diagnosis and clinical monitoring of patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and it is part of the classification criteria according to SLICC 2012. The purpose of this study was to verify the performance of the chemiluminescent immunoassay (CLIA) QUANTA Flash dsDNA and to compare it with the method currently in use, i.e the indirect immunofluorescence in Crithidia luciliae (CLIFT). One hundred and ninety five patients, who presented connective tissue diseases and required the study of anti-dsDNA antibodies, were analyzed. Thirty eight positive serum samples were obtained, 133 were negative and 24 (12.3%) in disagreement. Within the discordant results, there were 17 that corresponded to patients with SLE and they were grouped in 16 CLIA+/CLIFT- and 1 CLIA-/CLIFT+. The accuracy performance was assessed according to the EP15-A2 protocol and linearity. Concordance and correlation were calculated with the Kappa and Spearman's Rho coefficient, respectively. Based on the good performance observed and the discordant results analyzed, the best strategy for CLIA implementation would be to combine it with CLIFT, which would increase the diagnostic sensitivity without losing specificity.

Resumo A determinação dos anticorpos anti-dsDNA é de utilidade para o diagnóstico e seguimento clinico de pacientes com lúpus eritematoso sistêmico (LES) e é um dos critérios de classificação do SLICC 2012. O objetivo do estudo foi verificar o desempenho do imunoensaio quimioluminescente (CLIA) QUANTA Flash dsDNA e compará-lo com o método em uso imunofluorescência indireta em Crithidia luciliae (CLIFT). Foram analisados com os dois métodos, 195 pacientes com diagnóstico de doenças do tecido conjuntivo e solicitude de anticorpos anti-dsDNA. Os resultados foram agrupados em 38 soros positivos, 133 negativos e 24 (12,3%) discordantes. Entre esses resultados discordantes, 17 corresponderam a pacientes com LES e se agruparam em 16 CLIA+/CLIFT- e 1 CLIA-/CLIFT+. Foi verificado o desempenho para precisão seguindo o protocolo EP15-A2 e a linearidade. Foi estudada a concordância mediante o coeficiente Kappa e correlação com o coeficiente Rho de Spearman. Observou-se maior sensibilidade diagnóstica para CLIA. O grau de acordo foi moderado e boa correlação foi observada entre os valores quantitativos de CLIA e os títulos de CLIFT. Com base no bom desempenho encontrado e nos resultados discordantes analisados, a melhor estratégia para implementar o CLIA seria utilizá-lo em combinação com o CLIFT, o que aumentaria a sensibilidade do diagnóstico sem perder a especificidade.

Diferencias fenotípicas de fibroblastos gingivales en sujetos con hiperplasia gingival idiopática frente a sujetos periodontalmente sanos: estudio piloto / Phenotypic differences of gingival fibroblasts in subjects with idiopathic gingival hyperplasia versus periodontally healthy subjects: a pilot study

Objetivo: identificar, describir y diferenciar las características fenotípicas de los fibroblastos gingivales (FGs) en pacientes con hiperplasia gingival idiopática (HGI) e individuos periodontalmente sanos. Métodos: los FGs fueron aislados a partir de tejido gingival de individuos periodontalmente sanos (n=2) y pacientes con HGI (n=2). Los FGs se cultivaron en el medio DMEM (Dulbecco's Modified of Eagle Medium) a 37°C con 5% de CO2. La identificación y localización de la actina, vimentina y mitocondrias en FGs fue realizada y evaluada microscópicamente mediante inmunofluorescencia con anticuerpos monoclonales. La capacidad de migración de los FGs en los pacientes con HGI e individuos sanos también fue estudiada. Resultados: todos los FGs fueron mononucleares, fusiformes y con prolongaciones citoplasmáticas visibles. La faloidina permitió identificar una densa red de actina en los FGs de pacientes con HGI, contrariamente a los FGs de individuos periodontalmente sanos. La vimentina y mitocondrias fueron identificadas en los FGs de individuos sanos y pacientes con HGI sin ninguna alteración en su expresión y localización. La migración de la monocapa de los FGs indicó una actividad de migración celular importante en los FGs de los pacientes con HGI, en relación a los FGs de los individuos periodontalmente sanos. Conclusión: los FGs de pacientes con HGI conservan características fenotípicas celulares similares a los FGs de individuos periodontalmente sanos. Sin embargo, los FGs de pacientes con HGI simulan tener una mayor capacidad migratoria que amerita ser explorada en futuros trabajos de investigación.

Objective: To identify and to describe the phenotypic characteristics of gingival fibroblasts from patients with idiopathic gingival hyperplasia (IGH) and periodontally healthy individuals. Methods: Gingival fibroblasts (GFs) were isolated from gingival tissue from periodontally healthy individuals (n=2) and patients with IGH (n=2). The GFs were grown in DMEM (Dulbecco's Modified of Eagle Medium) at 37°C with 5% CO2. The identification and location of actin, vimentin and mitochondria in GFs were performed and evaluated microscopically by immunofluorescence with monoclonal antibodies. The migration capacity of GFs from IGH and healthy individuals was also studied. Results: All the GFs were mononuclear, fusiform and with visible cytoplasmic extensions. The phalloidin allowed to identify a dense actin network in the GFs of patients with IGH, contrary to the GFs of periodontally healthy individuals. Vimentin and mitochondria were identified in the GFs of healthy individuals and patients with IGH without any alteration in their expression and location. Monolayer migration of GFs indicates significant cell migration activity in the GFs of patients with IGH in relation to the GFs of periodontally healthy individuals. Conclusion: GFs from patients with IGH retain cellular phenotypic characteristic similar to GFs from periodontally healthy individuals. However, the GFs of patients with IGH simulate having a greater migratory capacity that deserves to be explored in future research works.

Frecuencia de patrones de anticuerpos antinucleares, en pacientes con sospecha de enfermedades sistémicas reumáticas autoinmunes / Frequency of antinuclear antibodies patterns in patients with suspected of systemic autoimmune rheumatic diseases / Frequência de Padrões de anticorpo antinucleares em pacientes com suspeita de doenças sistêmicas reumáticas autoimunes / Fréquence des profils d'anticorps antinucléaires dans les cas de suspicion de maladies rhumatismales auto-immunes systémiques

Resumen Objetivo: El objetivo de este trabajo es describir la frecuencia de los patrones de tinción de Anticuerpos antinucleares (ANA), en pacientes con sospecha de enfermedades autoinmunes, en el sureste mexicano. Materiales y métodos: Se emplearon células Hep-2 y anticuerpo anti-IgG acoplado a FITC (EuroimmunTM) para el análisis de las muestras a través de inmunofluorescencia indirecta. Resultados: Del total de los pacientes, 89 fueron mujeres (87.2%) y 13 hombres (12.7%), en edades de 2 a 88 años. Se observó que 85 muestras (70.6 %) correspondieron al patrón nuclear, 10 (9.8 %) al patrón citoplasmático y 7 (6.8 %) al patrón mitótico. De los patrones nucleares, 37 (36.8%), 17 (16.7%) y 12 (11.8%) correspondieron a patrones homogéneo, granular fino y granular grueso respectivamente. Conclusiones: En este trabajo se observó, que la mayor frecuencia de anticuerpos antinucleares se encontró en pacientes en edad productiva. Los patrones más observados fueron el homogéneo, granular fino y granular grueso. El patrón homogéneo se asocia a LES cuando se presenta en títulos altos.

Abstract Objective: The objective of this work was to describe the frequency of antinuclear antibody (ANA) staining patterns in patients with suspected autoimmune diseases in southeastern Mexico. Materials and methods: Hep2 cells and Anti-Human IgG coupled to FITC (EuroimmunTM) were used for analyzing samples through indirect immunofluorescence. Results: 87.2 % per cent (89) of the total number of patients were women and 12.7 % were men (13) aged from 2 to 88 years. It was observed that 85 samples (70.6%) corresponded to the nucleolar pattern, 10 (9.8%) to the cytoplasmic pattern and 7 (6.8%) to the mitotic pattern. Of the nuclear patterns, 37 (36.8%), 17 (16.7%) and 12 samples (11.8%) corresponded to homogeneous, nuclear fine speckled and nuclear coarse speckled patterns respectively. Conclusions: In this work, it was observed that the highest frequency of antinuclear antibodies was found in patients of productive age. The most observed patterns were the homogeneous, nuclear fine speckled and nuclear coarse speckled. The homogeneous pattern is associated with SLE when presented in high titers.

Resumo Objetivo: deste trabalho é descrever a frequência dos padrões de coloração de anticorpos antinucleares (ANA) em pacientes com suspeita de doenças autoimunes no sudeste mexicano. Materiais e métodos: células Hep-2 e anticorpo anti-IgG acoplado a FITC (EuroimmunTM) foram utilizados para a análise das amostras por imunofluorescência indireta. Resultados: Do total de pacientes, 89 eram mulheres (87,2%) e 13 homens (12,7%), com idade entre 2 e 88 anos. Observou-se que 85 amostras (70,6%) corresponderam ao padrão nuclear, 10 (9,8%) ao padrão citoplasmático e 7 (6,8%) ao padrão mitótico. Dos padrões nucleares, 37 (36,8%), 17 (16,7%) e 12 (11,8%) corresponderam aos padrões homogêneo, granular fino e granular grosso, respectivamente. Conclusões: Neste trabalho observou-se que a maior frequência de anticorpos antinucleares foi encontrada em pacientes em idade produtiva. Os padrões mais observados foram homogêneo, granular fino e granular grosso. O padrão homogêneo está associado ao LES quando ocorre em altos títulos.

Résumé Objectif : L'objectif de ce travail est de décrire la fréquence des profils de coloration des Anticorps Antinucléaires (ANA), dans les cas de suspicion de maladies auto-immunes, dans le sud-est du Mexique. Matériels et méthodes : Des cellules Hep-2 et un anticorps anti-IgG couplé au FITC (EuroimmunTM) ont été utilisés pour l'analyse desé chantillons par immunofluorescence indirecte. Résultats : Sur le total des patients, 89 étaient des femmes (87,2 %) et 13 des hommes (12,7 %), tous âgés de 2 à 88 ans. Il a été observé que 85 échantillons (70,6 %) correspondaient au patron nucléaire, 10 (9,8 %) au patron cytoplasmique et 7 (6,8 %) au patron mitotique. Parmi es patrons nucléaires, 37 (36,8%), 17 (16,7%) et 12 (11,8%) avaient respectivement un aspect homogène, moucheté à grains fins et moucheté à gros grains. Conclusions : Dans travail, il a été observé que la fréquence la plus élevée d'anticorps antinucléaires a été trouvée chez les patients en âge productif. Les aspects les plus observés ont été de type homogène, moucheté à grains fins et moucheté à gros grains. L'aspect homogène est associé à l'ELS lorsqu'il est présenté en titres élevés.

Dinámica de anticuerpos e infección activa por Anaplasma marginale en becerras / Dynamics of Anaplasma marginale Active Infection and Antibodies in Calves

Resumen Históricamente, la especie bovina ha sido de vital importancia para el hombre como animal de abasto, por lo que el cuidado y protección a esta especie es muy importante. A nivel mundial existen diversas enfermedades que atacan el ganado bovino, entre las cuales se encuentra anaplasmosis bovina. La presente investigación no experimental de campo tiene como objetivo evaluar la dinámica de anticuerpos anti-Anaplasma y determinar en qué momento el animal presenta infección activa. Para ello, se escogió una población de 35 becerras ubicadas en la unidad de producción del municipio Crespo, en el estado de Lara, Venezuela. A las becerras, de 0 a 7 días de nacidas, se le extrajo la sangre en tubos con anticoagulante, para realizar frotis de capa blanca y determinación del hematocrito, y sin anticoagulante, para la inmunofluorescencia indirecta. Posteriormente, fueron muestreadas cada 15 días hasta obtener un total de 12 muestras por cada becerra. Para analizar los datos, fue utilizada la prueba estadística X2 del programa estadístico Epi Info versión 3.5.4. Se obtuvo un 79,05 % de positividad y 100 % de seropositividad para Anaplasma marginale. Se concluyó que los altos valores obtenidos con las pruebas serológicas son indicativos de animales con memoria inmunológica, lo que quiere decir que no necesariamente estarían infectados al momento del muestreo. Asimismo, se confirma la capacidad de la especie bovina de crear un estado de premunición ante la anaplasmosis a edades tempranas y mantenerla por un periodo prolongado, de modo que se encuentra una estabilidad enzoótica en la unidad de producción.

Abstract Bovine species has been historically of high importance to the human beings as a provision animal. Therefore, it is highly important to care and protect this species. There are different diseases attacking the bovines around the world, such as the bovine anaplasmosis. This non-experimental research in the field aims to evaluate the dynamics of anti-Anaplasma antibodies and to determine when the animal has an active infection. To do so, a population of 35 female calves was used from the production unit in the town Crespo, Lara State, Venezuela. Female calves, from 0 to 7 days born, were taken blood samples in test tubes with anticoagulant. Then a white smear test was carried out and the hematocrit was determined. Samples without anticoagulant were taken to do an indirect immunofluorescence test. The calves were taken blood samples every 15 days in order to complete 12 samples from each individual calf. For the data analysis, the statistical test X2 from the software Epi Info v.3.5.4 was used. Positive tests accounted for 79.05 % of the samples and seropositiveness for Anaplasma marginale reached 100%. It is concluded that the high values resulting from the serologic tests indicate that these animals have an immune memory, which means, in turn, that they were not necessarily infected at the time of being taken the samples. Likewise, this study confirms that this species is able to create a pre-immunity condition to the anaplasmosis at an early age and to keep it for a long term. This way, they reach an enzootic balance in the production unit.

Inmunofluorescencia indirecta versus reacción de polimerasa en cadena para el diagnóstico de virus respiratorios en niños ingresados en un hospital de la Región Metropolitana / Indirect immunofluorescence technique versus polymerase chain reaction for the diagnosis of respiratory viruses in children admitted to a hospital in the Metropolitan Region

Resumen Introducción: La temprana detección viral en infecciones respiratorias agudas (IRA) es esencial para establecer una terapia apropiada y prevenir el contagio intrahospitalario. Objetivo: Comparar la eficacia de la técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI) con la reacción de polimerasa en cadena (RPC) para identificar virus respiratorios en niños hospitalizados por IRA. Métodos: Se incluyeron 47 aspirados nasofaríngeos de niños ≤ 2 años con IRA. La IFI incluyó virus respiratorio sincicial (VRS), adenovirus, influenza A y B y parainfluenza. La RPC incluyó, además, la detección de metapneumovirus, enterovirus/rinovirus, bocavirus y coronavirus. Se estimó sensibilidad, especificidad, valor predictor positivo y negativo (VPP/VPN) y correlación kappa para VRS mediante IFI en comparación a la RPC. Resultados: La IFI detectó únicamente VRS (29; 61,7%). La RPC detectó diversos virus, entre ellos VRS en 26 casos (55,3%), seguido por bocavirus (29,8%), enterovirus/ rinovirus (21,3%), adenovirus (14,9%) y parainfluenza (4,3%) entre otros, con 35,5% de co-infección. La IFI presentó sensibilidad: 85,7%, especificidad: 73,6%, VPP: 82,7%, VPN: 77,7% y kappa: 0,5990 (IC 95%; 0,36360,8346) para VRS. Conclusión: La IFI presenta buena sensibilidad, pero moderada especificidad para VRS. Sin embargo, falla en la detección de otros virus respiratorios. La introducción de RPC permitiría mejorar el diagnóstico etiológico de las IRA de origen viral.

Background: Early viral detection in acute respiratory infections (ARI) is essential to establish appropriate therapy and prevent nosocomial transmission. Objective: To compare the efficacy of indirect immunofluorescence technique (IIF) with the polymerase chain reaction (PCR) to identify respiratory viruses in children hospitalized for ARI. Methods: 47 nasopharyngeal aspirates of children ≤ 2 years with ARI were included. IFI included respiratory syncytial virus (RSV), adenovirus, influenza A and B and parainfluenza. PCR also included the detection of metapneumovirus, enterovirus/rhinovirus, bocavirus and coronavirus. Sensitivity, specificity, positive and negative predictive value (VPP/NPV) and kappa correlation for RSV were estimated by IIF compared to PCR. Results: The IIF detected only RSV (29; 61.7%). PCR detected several viruses, including RSV in 26 cases (55.3%), followed by bocavirus (29.8%), rhinovirus/enterovirus (21.3%), adenovirus (14.9%) and parainfluenza (4,3%) among others, with 35.5% of coinfection. The IIF presented sensitivity: 85.7%, specificity: 73.6%, PPV: 82.7%, NPV: 77.7% and kappa: 0.5990 (95% CI, 0.3636-0.8346) for RSV. Conclusion: The IIF presents good sensitivity, but moderate specificity for RSV. However, IIF fails to detect other respiratory viruses. The introduction of PCR would improve the etiological diagnosis of ARI of viral origin.

Concentración sanguínea de troponina I en pacientes embarazadas sin y con preeclampsia severa / Troponin I blood concentration in pregnant patients without and with severe preeclampsia

Resumen OBJETIVO: Comparar la concentración sanguínea de troponina I en pacientes embarazadas sin y con preeclampsia severa. MATERIALES Y MÉTODOS: Estudio prospectivo y transversal efectuado en pacientes de una unidad médica de alta especialidad en Ginecología y Obstetricia de la Ciudad de México admitidas entre los meses de enero a mayo de 2019. Criterio de inclusión: pacientes de cualquier edad y paridad con más de 20 semanas de embarazo. Criterio de exclusión: mujeres con enfermedades previas que pudieran condicionar daño miocárdico. Para cuantificar la troponina I a todas se les tomó sangre venosa. El valor normal de la troponina I está entre 0 y 0.4 ng/mL. Se les tomó un electrocardiograma y una radiografía de tórax. Los reportes de ambos grupos se compararon. Se utilizó estadística descriptiva y prueba t de Student pareada. RESULTADOS: 71 mujeres reunieron los criterios de inclusión y se dividieron en dos grupos: 37 pacientes sin preeclampsia (grupo A) y 34 con preeclampsia (grupo B). La concentración sanguínea de la troponina I del grupo A fue 0.05 ± 0.008 ng/mL y del grupo B: 0.05 ± 0.02 ng/mL (p = 0.30). En el grupo B se encontraron alteraciones electrocardiográficas en 14.7% (n = 5) cuyos valores de troponina I fueron normales. La radiografía del tórax fue normal en 100%. CONCLUSIONES: La concentración sanguínea de troponina I en pacientes embarazadas sin y con preeclampsia severa resultó normal, incluidas las 5 mujeres con preeclampsia y alteraciones electrocardiográficas.

Abstract OBJECTIVE: To compare the blood concentration of Troponin I (TI) in pregnant patients without and with severe preeclampsia (SP). MATERIALS AND METHODS: Prospective, cross-sectional study, conducted in patients of a medical unit of high specialty of gynecology and obstetrics of Mexico City admitted in the period from January to May of the year 2019. Patients of any age and parity with pregnancy > 20 weeks were selected. Those with previous diseases that may condition myocardial damage were excluded. Venous blood was taken to quantify TI using the "Triage Cardiac Panel"® device of the Biosite® brand that runs an indirect immunofluorescence program coupled to a reader called "Triage Meter"®. For this test the normal value of TI is 0 to 0.4 ng/mL. An electrocardiogram and a chest X-ray were also performed. The results of both groups were compared. Descriptive statistics and the paired Student's T test were used. RESULTS: 71 women met the selection criteria. Two groups were formed: 37 patients without preeclampsia (group A) and 34 women with PS (group B). The blood concentration of TI in group A was 0.05 ± 0.008 ng / ml and in group B 0.05 ± 0.02 ng/mL (p = 0.30). In group B electrocardiographic abnormalities were found in 14.70% (5 cases) whose TI values were normal. Chest x-ray was normal in 100%. CONCLUSIONS: the blood concentration of TI in pregnant patients without and with PS was normal, including 5 preeclamptic women with electrocardiographic abnormalities.

Bartonella henselae: evidencia serológica en pacientes pediátricos con sospecha clínica de enfermedad por arañazo de gato / Bartonella henselae: Serological evidence in pediatric patients with clinical suspicion of cat scratch disease

La enfermedad por arañazo de gato (EAG) es producida por Bartonella henselae.Afecta principalmente a ninos y el reservorio es el gato doméstico. El diagnóstico de laboratorio se basa en la detección de anticuerpos por inmunofluorescencia indirecta (IFI). El objetivo de este trabajo fue analizar la evidencia serológica de infección por B. henselae en pacientes pediátricos que reunían criterios clínicos/epidemiológicos para la sospecha de EAG. Se estudió a 92 pacientes; de acuerdo con los resultados serológicos, estos fueron categorizados en 4 grupos: 1) IgG (+)/IgM (+), 31,5% (n = 29);2) IgG (-)/IgM (+), 10,9% (n = 10);3) IgG (+)/IgM (-), 9,8% (n = 9), y 4) IgG (-)/IgM (-), 47,8% (n = 44). La divulgación de estos resultados intenta promover futuros trabajos que investiguen la seroprevalencia de Bartonella spp. en Argentina. Esto permitirá conocer la importancia de esta zoonosis en nuestra población y evaluar nuevos puntos de corte para esta técnica serológica.

Cat scratch disease (CSD) is caused by Bartonella henselae, which mainly affects children. The cat is the reservoir. The laboratory diagnosis is based on the detection of antibodies by the Indirect Immunofluorescence (IFI) assay. The objective of this study was to analyze the serological evidence of B. henselae infection in pediatric patients that met the clini-cal/epidemiological criteria for suspected CSD. We studied 92 patients, who were categorized into four serological groups: 1) IgG (+)/IgM(+), 31,5% (n = 29); 2) IgG (-)/IgM(+), 10,9% (n = 10); 3) IgG (+)/IgM(-), 9,8% (n = 9); 4) IgG (-)/IgM(-), 47,8% (n = 44). These findings aim to promote future works for investigating the seroprevalence of Bartonella spp. in Argentina, which will allow us to know the importance of this zoonosis in our population and to evaluate new cut-off points of the technique.

Interpretación de los autoanticuerpos en enfermedades reumatológicas / Interpretation of autoantibodies in rheumatological diseases

RESUMEN Las enfermedades autoinmunes son un grupo de patologías crónicas en las que factores genéticos, ambientales y hormonales contribuyen a su aparición. Además de tener un amplio espectro clínico, la interpretación de los diversos autoanticuerpos y técnicas utilizadas en el laboratorio también son un reto clínico. Dada la complejidad de estas enfermedades, es muy importante apoyarse en las pruebas de laboratorio para establecer un correcto diagnóstico, seguimiento y, en algunos casos inclusive, establecer pronósticos o predicción de la posible aparición de autoinmunidad. Con todo esto se pretende mejorar la calidad de vida de los pacientes disminuyendo la gran morbimortalidad de este grupo de enfermedades, especialmente al diagnosticarlas en etapas tempranas. La mayoría de las enfermedades reumatológicas se caracterizan por la alta producción de autoanticuerpos y reactantes de fase aguda, los cuales están implicados en su fisiopatología produciendo daño directo a nivel sistémico. Entre estas, el lupus eritematoso sistémico, la artritis reumatoide y el síndrome de Sjögren son las más reconocidas. Portales motivos, el objetivo de este trabajo es hacer una revisión que permita guiar tanto a médicos como a personal de laboratorio en la interpretación de los diferentes autoanticuerpos en enfermedades autoinmunes.

ABSTRACT Autoimmune diseases are a group of chronic diseases in which genetic, environmental, and hormonal factors contribute to their appearance. In addition to having a broad clinical spectrum, the interpretation of the various autoantibodies and techniques used in the laboratory is also a clinical challenge. Given the complexity of these diseases, it is very important to rely on the results of laboratory tests to establish a correct diagnosis and follow-up and, in some cases even to establish a prognosis or prediction of autoimmunity. Taking all this into account, it is intended to improve the quality of life of patients by decreasing the increased morbidity and mortality in this group of diseases, especially by early diagnosis. Most rheumatological diseases are characterised by the high production of auto-antibodies and acute phase reactants, which are involved in their pathophysiology, leading to systemic involvement. Among these, the most recognised are, systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, and Sjögren's syndrome. For these reasons, the objective of this project is to present a review that will help both physicians and laboratory personnel in the interpretation of the different autoantibodies in autoimmune diseases.

Anticuerpos anti-DFS70: un nuevo autoanticuerpo útil en la exclusión de patologías autoinmunes / Anti-DFS70 antibodies: A new useful antibody in the exclusion of auto-immune diseases

RESUMEN Los anticuerpos anti-DFS70 (Dense Fine Speckle, peso molecular de 70 kd) son un subgrupo de anticuerpos antinucleares (ANA) de tipo natural, los cuales se manifiestan por un patrón moteado denso fino (DFS) por inmunofluorescencia indirecta. Este se caracteriza por la fluorescencia granular distribuida irregularmente en la interface de los núcleos y de la cromatina. Inicialmente, este anticuerpo fue descrito en pacientes con cistitis intersticial, dermatitis atópica y algunas neoplasias como el cáncer de próstata. Se ha encontrado que sus antígenos actúan directamente contra co-activadores de la transcripción nuclear (LEDGF/p75), codificada por el gen PSP1 y localizado en la región C terminal entre los a.a. 349 y 435. Adicionalmente, se documenta asociación con algunas funciones fisiológicas como la protección contra la apoptosis inducida por estrés, promover la supervivencia de las células epiteliales del cristalino y actuar como cofactor de replicación del virus VIH a través de su interacción con la integrasa viral. En el campo de la autoinmunidad se ha evidenciado recientemente la importancia de este anticuerpo como marcador biológico útil en la discriminación de personas con ANA positivos que no evolucionan a enfermedad autoinmune sistémica (EAI). Lo anterior se ha basado en la observación de que estos anticuerpos son más frecuentes en individuos sanos que en los pacientes con EAI y que los individuos sanos con anti-DFS70 positivo no desarrollaron EAI después de un seguimiento clínico por 4 arios o más. Este artículo revisa la descripción de los anti-DFS70 y su utilidad en la práctica clínica.

ABSTRACT Anti-DFS70 antibodies (Dense Fine Speckled, 70 kd molecular weight) are a sub-group of anti-nuclear antibodies (ANA) that show a fine dense speckled pattern (DFS) by indirect immunofluorescence. This pattern is also recognized by irregularly distributed granular fluorescence at the interface of nuclei and chromatin. This antibody was initially described in patients with interstitial cystitis, atopic dermatitis, and malignancy, such as prostate cancer. These antigens have been found to act directly against co-activators of nuclear transcription (LEDGF/p75) encoded by the PSP1 gene and located in the C-terminal region between the a.a. 349 and 435. Additionally, associations with some physiological functions have been described, such as protection against stress-induced apoptosis, the survival of lens epithelial cells, and acting as a cofactor of HIV replication through its interaction with viral integrase. As regards autoimmunity, recent evidence has also shown the importance of this antibody as a useful biological marker in the discrimination of individuals with positive ANA that do not progress to systemic autoimmune disease (SID). This is based on the observation that these antibodies are more common in healthy individuals than in patients with SID, and that healthy individuals with positive anti-DFS70 did not develop SIDs after a clinical follow-up of four years or more. This article reviews the description of anti-DFS70 and its usefulness in clinical practice.

Inmunoserología y métodos moleculares para el diagnóstico de Chagas: revisión sistemática rápida / Immunoserology and molecular techniques for diagnosis of Chagas´ disease: rapid systematic review / Imunoserologia e métodos moleculares para o diagnóstico de Chagas: revisão sistemática rápida

Con el objetivo de incrementar la precisión diagnóstica, la Organización Mundial de la Salud recomienda la realización de dos o más pruebas inmunoserológicas para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas en etapa crónica. El objetivo de este trabajo fue realizar una revisión sistemática rápida acerca del desempeño de las técnicas inmunoserológicas y métodos moleculares en la población general. Se identificaron 178 estudios de los cuales fueron incluidos nueve. Las técnicas de ELISA mostraron la mayor sensibilidad (82-98%) y especificidad (96-100%). Los métodos rápidos mostraron valores de sensibilidad entre 88-93% y especificidad 97- 100%, mientras que los métodos moleculares (PCR) presentaron niveles muy variables de sensibilidad (22-92%) y especificidad (70-100%). Estos resultados muestran que las técnicas de ELISA cuentan con una sensibilidad y especificidad adecuadas. La PCR, al igual que los métodos rápidos, mostró una gran variabilidad en los resultados, debido principalmente a la heterogeneidad de la técnicas y profusión de métodos elaborados de manera in house.

In order to increase diagnostic accuracy, the World Health Organization recommends performing two or more immunoserological tests for the diagnosis of Chagas disease in chronic stage. The aim of this work was to make a rapid systematic review of the performance of immunoserological techniques and molecular methods in the general population. A total of 178 studies were identified, nine ofwhich were included. ELISA techniques showed the highest sensitivity (82-98%) and specificity (96-100%). Rapid methods presented values of sensitivity between 88-93% and 97-100% of specificity, while the molecular methods (PCR) showed highly variable levels of sensitivity (22-92%) and specificity (70-100%). These results indicate that ELISA techniques have adequate sensitivity and specificity. PCR, as well as rapid methods, showed great variability in the results, mainly due to the heterogeneity of the techniques and abundance of "in-house" methods.

Visando a aumentar a precisão do diagnóstico, a Organização Mundial da Saúde recomenda executar dois ou mais testes imunoserológicos para o diagnóstico na fase crônica da doença de Chagas. O objetivo deste trabalho foi fazer uma revisão sistemática rápida sobre o desempenho de técnicas imunoserológicas e métodos moleculares na população em geral. Foram identificados 178 estudos dos quais se incluíram nove. Técnicas de ELISA mostraram a maior sensibilidade (82-98%) e especificidade (96-100%). Métodos rápidos apresentaram valores de sensibilidade e especificidade de 88-93% e 97-100%, respectivamente enquanto que os métodos moleculares (PCR) tinham níveis extremamente variáveis de sensibilidade (22-92%) e especificidade (70-100%). Estes resultados mostram que as técnicas de ELISA possuem sensibilidade e especificidade adequadas. A PCR, bem como os métodos rápidos, mostrou grande variabilidade nos resultados, principalmente devido à heterogeneidade das técnicas e profusão de métodos desenvolvidos de modo in house.

Valoración de exposición y endemicidad de Toxoplasma gondii en donantes de sangre en la provincia de Holguín, Cuba / Assessment of exposure and endemicity of Toxoplasma gondii among blood donors from the province of Holguín, Cuba

INTRODUCCIÓN: la toxoplasmosis es la enfermedad parasitaria más difundida en el mundo que afecta al hombre, descrita hace poco más de 100 años y producida por Toxoplasma gondii. Una de las formas que el hombre adquiere la enfermedad es a través de la placenta, de órganos trasplantados y por transfusiones de sangre; la forma infectante del parásito denominada "taquizoitos" es la responsable de este tipo de infección y ocurre durante la fase hematógena del mismo en un individuo seropositivo a T gondii. En Cuba al igual que en otras partes del mundo se ha demostrado la presencia de este parásito; en la provincia de Holguín su circulación se ha confirmado en receptores de trasplante renal. OBJETIVOS: conocer la seroprevalencia en donantes de sangre que motivó el interés para la realización de este trabajo. MÉTODOS: se evaluaron 892 muestras de sueros de donantes de los 14 municipios de la provincia de Holguín, el comportamiento serológico se determinó por la Técnica de Inmunofluorescencia Indirecta. RESULTADOS: la seropositividad para Inmunoglobulina G, anti Toxoplasma gondii de un 38,2 %, CONCLUSIONES: los donantes de la provincia de Holguín, están expuesto al Toxoplasma gondii, donde existe endemicidad del parásito en todo sus municipios y queda demostrado que los individuos procedentes de áreas rurales, tienen mayor incidencia de seropositivos al Toxoplasma gondii que los de áreas urbanas.

INTRODUCTION: Toxoplasmosis is a parasitic disease caused by Toxoplasma gondii. First described a little over 100 years ago, it is the most widely distributed parasitic disease affecting humans. The disease may be acquired from the placenta, from transplanted organs or from blood transfusions. The infecting form of the parasite, known as "tachyzoite", is responsible for this type of infection, which occurs during the hematogenous stage in a T. gondii-seropositive individual. The presence of this parasite has been demonstrated both in Cuba and in other regions of the world. In the province of Holguín its circulation has been confirmed in renal transplant recipients. OBJECTIVES: The purpose of the present study was to determine the seroprevalence of toxoplasmosis among blood donors. METHODS: An evaluation was conducted of 892 serum samples from donors from the 14 municipalities in the province of Holguín. Serological behavior was determined by indirect immunofluorescence technique. RESULTS: Seropositivity for anti-Toxoplasma gondii Immunoglobulin G was found to be 38.2 %. CONCLUSIONS: Blood donors from the province of Holguín are exposed to Toxoplasma gondii. The parasite is endemic in all municipalities, and it has been shown that Toxoplasma gondii seropositivity is higher in rural areas than in urban areas.

Importancia diagnóstica de los anticuerpos antinucleares

Los anticuerpos antinucleares se presentan en el suero de pacientes con enfermedades de origen reumáticas, como el lupus eritematoso sistémico, síndrome de Sjögren, esclerosis sistémica progresiva y polimiositis. En 1948, descubrieron la célula lupus eritematoso y su relación con el lupus eritematoso sistémico, señalando el carácter autoinmune de la enfermedad, al demostrar la existencia de unas sustancias que la llamarían autoanticuerpos. Las pruebas de los anticuerpos antinucleares son muy útiles en el estudio de las enfermedades autoinmunes del tejido conjuntivo. Cada una de ellas dispone de una colección particular de anticuerpos que ayuda, en unos casos, a poder establecer el diagnóstico y, en otros, además, a señalar el pronóstico de la enfermedad

Antinuclear antibodies present in the serum of patients with rheumatic diseases origin, such as Systemic Lupus Erythematosus, Sjögren's syndrome, Progressive Systemic Sclerosis and Polymyositis. In 1948, they discovered the lupus Erythematosus cell and its relationship with Systemic Lupus Erythematosus, pointing to the autoimmune nature of the disease, by demonstrating the existence of substances that autoantibodies call. Testing antinuclear antibodies are very useful in the study of autoimmune connective tissue diseases. Each has a private collection of antibodies that help, in some cases, be able to establish the diagnosis, in others point the prognosis of the disease. There proteins is very important, and it constitutes a valuable tool like marker inflammatory in rheumatologic illnesses of immunological origin

Evaluación y comparación de pruebas serológicas para la detección de la neosporosis bovina en Argentina / Evaluation and comparison of serological methods for the detection of bovine neosporosis in Argentina

Neospora caninum is a protozoan parasite that causes abortion and important economic losses in cattle worldwide. The accurate diagnosis of neosporosis is essential for management and control measures. The aims of this study were: i) to evaluate the performance of an in-house enzyme-linked immunosorbent assay based on the 38 kDa native antigen (p38-ELISA) to diagnose bovine neosporosis in Argentina using a well- characterized local sera panel from experimentally infected and naturally exposed cattle and ii) to compare the diagnostic performance and agreement of three N. caninum serological tests: p38-ELISA, indirect fluorescence antibody test (IFAT) and immunoblotting (IB) using the same sera panel. Serum samples testing either positive or negative by IFAT and IB were considered "Relative Standards of Comparison" (RSC) and used for p38-ELISA evaluation. Receiver operating characteristics analysis revealed that p38-ELISA was highly accurate (area under the curve= 0.982) according to RSC with a cut-off index of 0.0905. Relative sensitivity and specificity of p38-ELISA were 97.8 % and 99.5 %, respectively and agreement between RSC and p38-ELISA was almost perfect (k= 0.97). The evaluation and performance comparison of serological tests were performed according to the definition of gold standard based on the decision of the "majority of tests". All tests displayed high sensitivity and specificity values (greater than 95 %); and excellent agreement. This study describes the accurate performance of p38-ELISA evaluated locally and the highly accurate diagnostic performance of the studied tests for the detection of anti-N. caninum antibodies in cattle from Argentina.

Neospora caninum es un parásito protozoo responsable de abortos y pérdidas económicas en bovinos. La realización de un diagnóstico serológico preciso y con resultados comparables obtenidos por diferentes pruebas contribuye al manejo de este problema y a encarar medidas de control. Los objetivos del presente trabajo fueron los siguientes: 1) evaluar en Argentina una prueba de enzimoinmunoensayo in-house con el antígeno nativo de 38 kDa de N. caninum (ELISA-p38) para el diagnóstico de la neosporosis bovina, utilizando un panel de sueros locales bien caracterizados, procedentes de bovinos infectados de modo experimental o naturalmente expuestos; 2) comparar el desempeño y establecer el nivel de concordancia de tres pruebas serológicas para la detección de N. caninum, ELISA-p38, inmunofluorescencia indirecta (IFI) e inmunoblot (IB), con el mismo panel de sueros. Los sueros que resultaron positivos o negativos a IFI e IB fueron considerados como estándares relativos de comparación (ERC) para evaluar la prueba de ELISA-p38. El análisis de característica operativa del receptor determinó que la prueba de ELISA-p38 fue altamente precisa (área bajo la curva= 0,982) usando el punto de corte 0,0905. La sensibilidad y especificidad relativa del ELISA-p38 fue 97,8 % y 99,5 %, respectivamente, con una concordancia casi perfecta (k= 0,97) respecto del ERC. La comparación del desempeño de las pruebas se realizó usando como gold standard el criterio de la decisión de la "mayoría de las pruebas". Las pruebas exhibieron altos valores de sensibilidad y especificidad (mayores del 95 %) y excelente concordancia. Este trabajo describe un buen desempeño de la prueba de ELISA-p38 evaluada localmente y adecuada performance diagnóstica de las pruebas serológicas analizadas para la detección de anticuerpos anti N. caninum en bovinos de Argentina.

Estandarización, validación y aplicación de la inmunofluorescencia indirecta en un estudio epidemiológico de la infección por Trypanosoma cruzi / Standardization, validation and application of indirect immunofluorescence assay in an epidemiological study of Trypanosoma cruzi infection

En el presente trabajo se estandarizó una prueba de inmunofluorescencia indirecta (IFI) utilizando epimastigotes fijados de T. cruzi (aislado MHOM/VE/08/AU), se validó y posteriormente se aplicó para conocer la seroepidemiología de la infección por T. cruzi en Río Brito (estado Sucre). Los parásitos se cultivaron en infusión hígado triptosa y se fijaron con formaldehido (2%). Para la validación se usaron 49 sueros confirmados como positivos y 50 negativos para esta infección y para evaluar reacciones cruzadas se analizaron 48 sueros de pacientes confirmados con leishmaniasis cutánea, toxoplasmosis y helmintiasis. La prueba de IFI se aplicó para evaluar 50 muestras de sangre recogidas sobre papel de filtro, provenientes de Rio Brito, estado Sucre. Los factores de riesgo epidemiológicos se determinaron a través de la prueba de Fisher y la razón de probabilidades. La IFI fue 100% sensible y 93,9% específica. La seroprevalencia de la infección en la comunidad de Río Brito fue de 16%. Las variables asociadas a la infección fueron el reconocimiento del vector y su presencia alrededor de las viviendas. La seroprevalencia de esta parasitosis es elevada en Río Brito, en donde existen las variables epidemiológicas para mantener el ciclo del parásito.

An indirect immunofluorescence assay (IIF) was standardized using fixed epimastigotes of T. cruzi (isolate MHOM/VE/08/AU) and after validation was applied to determine the seroepidemiology of T. cruzi infection in Rio Brito (Sucre State). The parasites were grown in liver infusion tryptose and fixed with formaldehyde (2%). To validate, the test 49 confirmed as positive and 50 as negative for infection sera were used. To assess cross-reactions 48 sera from patients with confirmed cutaneous leishmaniasis, toxoplasmosis and helminthiasis were analyzed. The IIF test was used to evaluate 50 blood samples collected on filter paper, from Rio Brito, Sucre state population. The epidemiological risk factors were determined by Fisher’s exact test and the odds ratio. The IIF was 100% sensitive and 93.87% specific. The seroprevalence of infection in the community of Rio Brito was 16%. The variables associated with infection were the recognition of the vector and its presence around the houses. The seroprevalence of this infection is high in Rio Brito, where there are epidemiological variables to maintain the cycle of the parasite.

Estudio comparativo de dos métodos para la determinación de autoanticuerpos en hepatitis autoinmune / Comparative study of two methods in the determination of autoantibodies in autoimmune liver diseases / Estudo comparativo de dois métodos para a determinação de anticorpos no hepatite auto-imune

La hepatitis autoinmune es una inflamación hepatocelular que se caracteriza por diversos autoanticuerpos circulantes. En el presente trabajo se evaluó la concordancia entre los resultados obtenidos por la técnica ELISA y por la técnica de inmunofluorescencia indirecta (IFI) para la determinación de autoanticuerpos en hepatitis autoinmune. Se incluyeron 123 pacientes con hepatitis autoinmune, 91 (74%) del sexo femenino y 32 (26%) de sexomasculino, mayores de 18 años, en los cuales se realizó un estudio comparativo entre ELISA e inmunofluorescencia indirecta para la detección de los anticuerpos antinucleares (78 pacientes), anticuerpos antimitocondriales (84pacientes) y antimicrosoma hepatorrenal (85 pacientes). De acuerdo al valor kappa obtenido se encontró que para el anticuerpo antimicrosoma hepatorrenalel nivel de concordancia fue muy bueno (k=1,0, p<0,001); para el anticuerpoantinuclear el nivel de concordancia fue débil, sin embargo fue significativo(k=0,37, p<0,001) mientras que para el anticuerpo antimitocondrialel nivel de concordancia fue pobre (k=0,05, p<0,476). La determinación del anticuerpo antimicrosoma hepatorrenal fue la prueba con mayor sensibilidad, especificidad y concordancia entre ambas técnicas analizadas y se estableció que la técnica de ELISA para el anticuerpo antimitocondrial solo concuerda con la técnica de inmunofluorescencia indirecta en sujetos con títulos altos.

Autoimmune hepatitis is a hepatocellular inflammation which is characterized by different circulating autoantibodies. In this paper, the correlation between the results obtained by ELISA and indirect immunofluorescence technique for the determination of autoantibodies in autoimmune hepatitis was evaluated. One hundred and twenty-three patients with autoimmune hepatitis, 91 (74%) female and 32 (26%) male, over 18 years were included. In these patients, a comparative study between ELISA and indirect immunofluorescence detection of the antinuclear antibodies (78 patients), anti-mitochondrial antibodies (84 patients) and anti-liver kidney microsome (85 patients) was performed. According to the kappa value obtained, it was found that for anti-liver kidney microsome the level of agreement was very good (k=1.0, p<0.001) for antinuclear antibody, the level of concordance was weak but significant (k=0.37, p<0.001,) meanwhile antimitochondrial antibody level of concordance was poor (k=0.05, p<0.476).The determination of the antibody anti-liver kidney microsome was the test with greater sensitivity, specificity and concordance between the two techniques discussed and it was established that the ELISA technique for antimitochondrial antibody is only in concordance with the indirect immunofluorescence in patients with high titers.

A hepatite autoimune é uma inflamação hepatocelular, que se caracteriza pelos diferentes anticorpos circulantes. Neste trabalho foi avaliada a correlação entre os resultados obtidos através da técnica ELISA e da técnica de imunofluorescência indireta (IFI) para a determinação de auto-anticorpos na hepatite auto-imune. Foram incluídos 123 pacientes com hepatite autoimune, 91 (74%) do sexo feminino e 32 (26%) do sexo masculino, maiores de 18 anos, nos quais foi realizado um estudo comparativo entre ELISA e Imunofluoresência Indireta para a detecção dos anticorpos antinucleares (78 pacientes), anticorpos antimitocondriais (84 pacientes) e antimicrossomal hepatorrenal (85 pacientes). De acordo ao valor kappa obtido, foi encontrado que para o anticorpo antimicrossomal hepatorrenal o nivel de concordância foi muito bom (k=1,0, p<0,001); para o anticorpo antinuclear o nivel de concordância foi fraco, porém foi significativo (k=0,37, p<0,001) enquanto que para o anticorpo antimitocondrial o nivel de concordância foi pobre (k=0,05, p<0,476). A determinação do anticorpo antimicrossomal hepatorrenal foi o teste com maior sensibilidade, especificidade e concordância entre ambas técnicas analisadas e se estabeleceu que a técnica de ELISA, para o anticorpo antimitocondrial, só concorda com a técnica de Imunofluorescência Indireta em sujeitos com títulos altos.

Comparación de dos métodos serológicos para el diagnóstico de anticuerpos IgG anti-Toxoplasma gondii en neonatos / Comparison of two serological methods for the diagnosis IgG antibody against Toxoplasma gondii in newborn

Disímiles son los métodos serológicos empleados para la determinación de anticuerpos IgG anti-Toxoplasma gondii en diferentes muestras de estudio. El objetivo es realizar una comparación entre el método de Inmunofluorescencia Indirecta y el Toxoplasma látex porBrunella para demostrar cual es el método más sensible y específico para determinar seroprevalencia de anticuerpos IgG anti- Toxoplasma gondii en neonatos asistidos en la Sala de Neonatología del Hospital Valdimir Ilich Lenin. Se analizaron 30 muestras de sueros de niños recién nacidos asistidos en este Servicio por las dos pruebas, de ellas se conformaron dos grupos de trabajo. Los resultados demostraron que la prueba de Inmunofluorescencia Indirecta es la más útil para este diagnóstico, coincidiendo con investigaciones similares realizadas

Dissimilar are the methods used to determine the seroprevalence of IgG antibodies against to Toxoplasma gondii in different samples. In this research were compared to Indirect Immunofluorescence and Toxoplasma Latex by Brunelli to prove which of them is the most sensitive and specific to determine seroprevalence of IgG anti-Toxoplasma gondii in newborn in Neonatology Service at Lenin Hospital of Holguin Province, Cuba is the main objective. Thirty samples were analyzed of newborns treated in Neonatology Service using these methods, besides two working groups were formed. The sensitivity and specificity of Indirect Immunofluorescence were 100 % and 95 % respectively and Toxoplasma latex reported a sensitivity of 96.1 % and a specificity of 89.6 %. These results showed that the Indirect Immunofluorescence Technique is the most useful for these diagnostic and this result are similar with others investigations

Guías Latinoamericanas de la RIICER para el diagnóstico de las rickettsiosis transmitidas por garrapatas / Latinamerican guidelines of RIICER for diagnosis of tick-borne rickettsioses

Tick-borne rickettsioses are worldwide infectious diseases that are considered emerging and re-emerging. Until recently the only tick-borne rickettsiosis present in Latin America was Rickettsia rickettsii infection, but to date, with the incorporation of new tools as PCR and sequencing and the quick cellular close tube cultures (Shell-vial), new species has been involved as human pathogens. In these guidelines, we offer an update of the microbiological assays for diagnosing rickettsioses. Besides we have included a section in which the most important hard ticks involved in human rickettsioses in Latinoamerica are detailed.

Las rickettsiosis transmitidas por garrapatas son afecciones de distribución mundial, que por diferentes motivos se pueden considerar emergentes y reemergentes. Hasta hace escasos años la única rickettsiosis transmitida por garrapatas en Latinoamérica era la infección por Rickettsia rickettsii, pero en la actualidad y fundamentalmente, gracias a la incorporación de nuevas herramientas para el diagnóstico microbiológico como la reacción en cadena de la polimerasa y secuenciación o el cultivo celular rápido en tubo cerrado, se han descrito e involucrado otras especies de Rickettsia en la producción de patología humana. En estas guías se detallan y describen las diferentes técnicas utilizadas para el diagnóstico microbiológico de las rickettsiosis. Además, se incluye una sección en la que se detallan las especies más importantes de garrapatas duras relacionadas con las rickettsiosis en Latinoamérica, con claves para su clasificación taxonómica.

Determinación de anticuerpos anticitoplasma de neutrófilos mediante inmunofluorescencia Indirecta para el diagnóstico de las vasculitis / Antineutrophil cytoplasmic antibodies determination for vasculitis diagnosis

Introducción: los anticuerpos anticitoplasma de neutrófilos contribuyen al diagnóstico de las vasculitis sistémicas. Objetivo: demostrar el valor diagnóstico de la determinación de estos anticuerpos mediante inmunofluorescencia indirecta realizando su estandarización y validación. Material y Métodos: se realizó la estandarización y validación de la determinación de anticuerpos anticitoplasma de neutrófilos mediante inmunofluorescencia indirecta. La muestra estuvo constituida por 20 pacientes con vasculitis sistémica, 45 con enfermedades reumáticas y 24 individuos sanos. Resultados y Discusión: la sensibilidad, especificidad, valores predictivos y eficacia del método fueron adecuados y se obtuvo una buena concordancia con los ensayos de referencia. Estos anticuerpos estuvieron presentes en los pacientes con vasculitis (54%), con artritis reumatoide (19%) y con lupus eritematoso sistémico (37%). Conclusiones: el método desarrollado tiene una gran utilidad diagnóstica y puede ser aplicado en el estudio de las vasculitis sistémicas, encontrándose una buena concordancia entre los patrones y las especificidades antigénicas.

Introduction: antineutrophil cytoplasmic antibodies contribute to the diagnosis of systemic vasculitis. Objective: demonstrate the diagnostic value of Antineutrophil cytoplasmic antibodies assessing by indirect immunofluorescence doing its standardization and validation. Material and methods: standardization and validation of antineutrophil cytoplasmic antibodies determination by indirect immunofluorescence. The sample consisted of 20 patients with systemic vasculitis, 45 with rheumatic diseases and 24 healthy individuals. Results and Discussion: the sensitivity, specificity, and predictive values were adequate. Good method performance and good agreement was obtained with the reference tests. These antibodies were present in patients with vasculitis (54%), rheumatoid arthritis (19%) and systemic lupus erythematosus (37%). Conclusions: the developed method has a great diagnostic usefulness and can be applied in the study of systemic vasculitis, finding a good match between the patterns and antigenic specificities.

Concordancia entre la determinación de anticuerpos antinucleares por inmunofluorescencia e inmunoensayo lineal / Concordance between antinuclear antibody determination by immunofluorescence and line immunoassay

Introducción: La inmunofluorescencia indirecta (IFI)sobre células Hep-2 es la prueba usada para la tamización deautoanticuerpos en enfermedades del tejido conectivo, en tanto queel perfil de anticuerpos específicos se puede detectar por métodosinmunométricos como el inmunoensayo lineal en soporte sólido (LIA).Objetivos: 1) evaluar el desempeño de un LIA comercial en el suerode pacientes, y compararlo con la determinación de anticuerposantinucleares por IFI; 2) describir el perfil de los autoanticuerposdetectados por las dos pruebas; y 3) conocer la frecuencia de losdiferentes autoanticuerpos en los pacientes evaluados. Materialesy métodos: se incluyeron 72 pacientes consecutivos, con sospechade enfermedad autoinmune, que consultaron en el HospitalPablo Tobón Uribe en Medellín, Colombia. Las muestras fueronprocesadas por IFI y por LIA. Resultados: el patrón homogéneoy el moteado fueron los más frecuentes en estos pacientes. Losanticuerpos específicos que prevalecieron fueron los anti-histonas,anti-nucleosomas y anti-dsDNA; estos hallazgos eran esperablespues son los anticuerpos que se asocian al patrón homogéneo, quefue el más prevalente. Se encontró una concordancia del 68,05%entre los resultados por ambos métodos. Conclusiones: la bajaconcordancia entre las dos pruebas, menor que la reportada enla literatura (90%), pudo ser el resultado de la baja probabilidadpre-test de los pacientes incluidos en el estudio. Entre las ventajasdel LIA se encuentra que acorta el tiempo del diagnóstico y delinicio del tratamiento, su mayor sensibilidad y especificidad, y laposibilidad de identificar los anticuerpos específicos de maneraindividual, además de detectar anticuerpos extraíbles que no sonidentificados por IFI.

Abstract: Introduction:Indirect immunofluorescence (IFI) on Hep-2 cells is the test used for screening autoantibodies in connective tissue diseases, while the profile of specific antibodies can be detected by immunometric methods such as solid support line immunoassay (LIA). Objectives: 1) To evaluate the performance of a commercial LIA on serum of patients, and compare it with the determination of antinuclear antibodies by IFI, 2) to describe the profile of the autoantibodies detected by both tests, and 3) to determine the frequency of the different autoantibodies in the evaluated patients. Materials and methods: We included 72 consecutive patients with suspected autoimmune disease that consulted the Pablo Tobón Uribe Hospital in Medellín, Colombia. The samples were processed by IFI and LIA. Results:The homogeneous and speckled patterns were more common in these patients. The most prevalent specific antibodies were the anti-histone, anti-nucleosome and anti-dsDNA; these findings were expected because these are the antibodies associated with the homogeneous pattern, which was the most prevalent. There was a 68,05% concordance between the results by both methods. Conclusions:The low concordance between the two tests, lower than that reported in the literature (90%), could be the result of low pre-test probability of the patients included in the study. The advantages of LIA include that it allows shortening the time of diagnosis and initiation of treatment, its highest sensitivity and specificity, and the ability to individually identify specific antibodies, as well as to detect extractable antibodies that are not identified by IFI.